2) Clonage du gène
Les scientifiques préfèrent copier ce gène thérapeutique pour ne pas risquer de le perdre malencontreusement. Les méthodes pour cloner un gène sont variées et la plupart du temps complexes.
Le clonage par les bactéries est la méthode la plus simple et c'est donc celle que nous allons utiliser. Les bactéries ont un fort pouvoir de multiplication. Cette multiplication est assurée par des plasmides. Ces plasmides sont de petites molécules d'ADN circulaires qui ont la capacité d'assurer une réplication autonome. Ces molécules sont également indépendantes de la cellule qui les transporte car elle ne sont pas essentielles à sa survie et c'est ce qui va nous intéresser ici. Cette indépendance est traduite par le fait qu'elles peuvent sauter d'une cellule à une autre facilement. C’est par l’intermédiaire des plasmides qu’on introduira dans les bactéries en culture le gène. Chaque plasmide contient une séquence d’ADN qui sert d’origine de réplication. Grâce à une enzyme de restriction nous allons couper l’ADN plasmidique de sorte a ce qu’il forme deux extrémités cohésives. Ensuite nous n'aurons plus qu'à rajouter au bout de notre gène les mêmes extrémités pour qu'il se fixe naturellement. On va alors utiliser une enzyme d'ADN ligase aux deux bouts du plasmide qui va nous permettre ainsi de refermer le plasmide. Une fois le plasmide refermé, il ne nous reste plus qu'à mettre la bactérie en culture dans les meilleures conditions possibles.
